fa تمایز سلول‌های بنیادی پرتوان القایی موش (miPSCs) به سمت سلول‌های زایای نر (mGCs) توسط رتینوئیک اسید و تستوسترون تولیدمثل Reproduction پژوهشی اصيل Original Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:12px;"><span style="font-family:Tahoma;"><strong>مقدمه:</strong> اهدای سلول جنسی و یا تولید سلول‌های جنسی از طریق سلول‌های زایا و تهیه منبع این سلول‌ها از طریق سلول‌های بنیادی جنینی و سلول‌های بنیادی پرتوان القایی، روش‌هایی برای درمان آزواسپرمی، که حتی فاقد سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی می باشند، در نظر گرفته می‌شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی اثر رتینوئیک اسید و تستوسترون بر تمایز سلول‌های بنیادی پرتوان القایی موش به سمت سلول‌های زایای نر می‌باشد.<br> <strong>مواد و روش‌ها:</strong> از سلول‌های فیبروبلاست جنینی موش (<span dir="LTR">MEFs</span>) به عنوان بستری از سلول‌های تغذیه کننده برای سلول‌های بنیادی پرتوان القایی موش (<span dir="LTR">miPSCs</span>) استفاده و غیر فعال گردیدند. سلول‌های بنیادی مورد نظر به اجسام امبریوئیدی (<span dir="LTR">EBs</span>) تبدیل شدند. چهار گروه شامل کنترل، رتینوئیک اسید (<span dir="LTR">RA</span>)، تستوسترون (<span dir="LTR">T</span>) و گروه ترکیبی رتینوئیک اسید به همراه تستوسترون (<span dir="LTR">RA+T</span>) در بازه‌های زمانی روزهای صفر، 4 و 7 تنظیم شد. ژن های مورد نظر <span dir="LTR">Stra8 (Stimulated by Retinoic Acid 8)</span>، <span dir="LTR">Ddx4 (DEAD-Box Helicase 4)</span> و <span dir="LTR">AKAP3 (A-Kinase</span> <span dir="LTR">Anchoring Protein 3)</span> بودند و بیان آن‌ها توسط تکنیک <span dir="LTR">Real Time</span> <span dir="LTR">PCR</span> بررسی گردید. داده‌های آماری با نرم افزار <span dir="LTR">SPSS</span> و <span dir="LTR">One-</span><span dir="LTR">Way ANOVA</span> و آزمون <span dir="LTR">Tukey</span> و با سطح معنی‌دار بودن <span dir="LTR">P<0.05</span> آنالیز شدند.<br> <strong>یافته ها: </strong>داده‌ها نشان داد که بیان ژن <em><span dir="LTR">Stra8</span></em> در روز صفر و در گروه <span dir="LTR">RA</span> نسبت به گروه <span dir="LTR">T</span> افزایش معنی‌داری دارد (<span dir="LTR">P<0.05</span>) و نسبت به گروه کنترل نیز افزایش داشت ولی معنی‌دار نبود. همچنین، بین گروه<span dir="LTR"> RA+T</span> و گروه کنترل و نیز این گروه و گروه <span dir="LTR">T</span> &nbsp;افزایش معنی‌داری مشاهده شد (<span dir="LTR">P<0.001</span>). بیان ژن <em><span dir="LTR">Ddx4</span></em> در تمامی روزها و در تمامی گروه‌ها هیچ تفاوت معنی داری نداشت. بیان ژن <em><span dir="LTR">AKAP3</span></em> هم در روز 4، بین گروه <span dir="LTR">T</span> و <span dir="LTR">RA</span> افزایش معنی‌داری دیده شد (<span dir="LTR">P<0.01</span>)؛ اما، بین گروه <span dir="LTR">T</span> و گروه <span dir="LTR">RA+T</span> میزان بیان کاهش یافت (<span dir="LTR">P<0.01</span>). این ژن در روز 7 بین گروه <span dir="LTR">RA+T</span> نسبت به گروه کنترل، &nbsp;<span dir="LTR">T</span>و <span dir="LTR">RA</span> اختلاف معنی‌دار بود (<span dir="LTR">P<0.001</span>).<span style="font-size:10.0pt;"></span><br> <strong>&nbsp;نتیجه‌گیری:</strong> کنترل تمایز سلول‌های بنیادی پرتوان القایی موش (<span dir="LTR">miPSCs</span>) بسیار سخت است و در این مطالعه، نقش هورمون تستوسترون در شرایط آزمایشگاهی و در این فرآیند تمایز</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"><span style="font-size:12px;"><span style="font-family:Tahoma;"> با دقت بررسی شد. برای گروه تیمار شده با تستوسترون نشان داده شد که اثر ترکیبی این هورمون با رتینوئیک اسید می‌تواند روند تمایزی را تقویت نماید</span></span>.</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:6.0pt;"></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Introduction:</strong> Donation of sex-specific cells or production of germ cells through germ cells and preparation of the source of these cells by using embryonic stem cells and induced pluripotent stem cells are considered as methods for treating azoospermia, even in the absence of spermatogonia stem cells. The aim of the present study was to investigate the effect of retinoic acid and testosterone on the differentiation of mouse-induced pluripotent stem cells into male germ cells.<strong><span dir="RTL"></span></strong><br> <strong>Material and methods:</strong> Inactivated mouse embryonic fibroblast cells (MEFs) were used as feeding cells for mouse-induced pluripotent stem cells (miPSCs). These stem cells were transformed into embryoid bodies (EBs). Four groups including control, retinoic acid (RA), testosterone (T), and the combined group of retinoic acid with testosterone (RA+T) were adjusted at intervals of days 0, 4, &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;and 7. The target genes were Stra8 (Stimulated by Retinoic Acid 8), Ddx4 (DEAD-Box Helicase 4), and AKAP3 (A-Kinase Anchoring Protein 3), and their expression was assessed by the Real-Time PCR technique. Statistical data were analyzed by SPSS software, one-way ANOVA, and Tukey test with a P-value of <0.05 regarded as significant.<strong><span dir="RTL"></span></strong><br> <strong>Results:</strong> The data showed that the expression of Stra8 gene on day 0 in RA group had a significant increase compared to T group (P<0.05) and a non-significant increase compared to the control group. Also, a significant increase was observed in RA+T group compared to the control group, as well as the T group (P<0.001). Ddx4 gene expression was not significantly different for different days and groups. The expression of AKAP3 gene was significantly increased between T and RA group on day 4 (P<0.01), but the expression was decreased between group T and RA+T group (P<0.01). On day 7, the expression of this gene was significantly different between RA+T, control, T, and RA groups (P<0.0001).<br> <strong>Conclusion:</strong> Control of differentiation of induced pluripotent stem cells (miPSCs) in mouse is very difficult and in this study, the role of testosterone in vitro, in this differentiation process was carefully investigated. For the testosterone-treated group, it was shown that the combined effect of testosterone with retinoic acid enhances the differentiation process.</div> &nbsp;<strong><span dir="RTL"></span></strong> ,ناباروری؛ سلول های بنیادی پرتوان القایی؛ سلول های زایا؛ تستوسترون؛ رتینوئیک اسید. ,ناباروری؛ سلول های بنیادی پرتوان القایی؛ سلول های زایا؛ تستوسترون؛ رتینوئیک اسید. 61 69 http://saremjrm.com/browse.php?a_code=A-10-1-102&slc_lang=fa&sid=1 Javad Amini Mahabadi جواد امینی مهابادی j.mahabadi64@gmail.com 10031947532846004216 10031947532846004216 No Sarem Fertility and Infertility Research Center (SAFIR), Sarem Women’s Hospital, Iran University of Medical Science (IUMS), Tehran, Iran. & Sarem Cell Research Center (SCRC), Sarem Women’s Hospital, Iran University of Medical Sciences (IUMS), Tehran, Iran. & PhD of reproductive biology, Gametogenesis Research Center, Kashan University of Medical Sciences, Kashan, Iran. مرکز تحقیقات باروری و ناباروری صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران. و پژوهشکده سلولی و مولکولی و سلول های بنیادی صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران. و دکتری تخصصی بیولوژی تولیدمثل؛ مرکز تحقیقات گامتوژنزیس دانشگاه علوم پزشکی کاشان، کاشان، ایران. Alireza Amini Mahabadi علیرضا امینی مهابادی 10031947532846004217 10031947532846004217 No Responsible for administrative affairs, Payame Noor University, Ardestan, Isfahan, Iran. مسئول امور اداری، دانشگاه پیام نور، اردستان، اصفهان، ایران Mojgan Faghihi مژگان فقیهی 10031947532846004218 10031947532846004218 No Sarem Fertility and Infertility Research Center (SAFIR), Sarem Women’s Hospital, Iran University of Medical Science (IUMS), Tehran, Iran. مرکز تحقیقات باروری و ناباروری صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Hossein Nikzad حسین نیک زاد 10031947532846004219 10031947532846004219 No Full professor of Anatomical science, Gametogenesis Research Center, Kashan University of Medical Sciences, Kashan, Iran. استاد تمام؛ مرکز تحقیقات گامتوژنزیس دانشگاه علوم پزشکی کاشان، کاشان، ایران. Abolfazl Abolfazl Aazami Tameh ابوالفضل اعظمی طامه abolfazl1980@gmail.com 10031947532846004220 10031947532846004220 Yes Full professor of Anatomical science, Anatomical Science Research Center, Kashan University of Medical Sciences, Kashan, Iran. استاد تمام؛ مرکز تحقیقات آناتومی؛ دانشگاه علوم پزشکی کاشان، بلوار قطب راوندی، کاشان.