Sarem Journal of Medical Research

fa گزارش نوع موتاسیون و اندازه گیری دقیق تکرارهای CGG ژن FMR1 در چهار بیمار ایرانی با نارسایی زودرس تخمدان (POI) و ناباروری ناشناخته Report of Mutation type and Accurate Sizing of FMR1 CGG Repeats in Four Iranian Patients with Primary Ovarian Insufficiency (POI) and Idiopathic Infertility بيماری‌های زنان Women Diseases گزارش مورد Case Report <pre> زمینه و هدف: ژن عامل سندرم ایکس (X) شکننده همراه با ناتوانی ذهنی 1 (The fragile X mental) (FMR1 retardation 1) دارای توالی تکرار CGG در 5’ UTR ناحیه پروموتور خود می‌باشد که گسترش این تکرارها می‌تواند منجر به بیماری  نورولوژیکی ایکس شکننده و تولید مثلی شود. تکرارهای بیش از 200CGG  به عنوان جهش کامل نام برده می‌شود که موجب سندرم X شکننده می‌گردد. تعداد تکرارهای بین 55 تا 200 CGG به عنوان پیش جهش تعریف می‌شوند و می‌&zwj;‌‌توانند موجب نارسایی زودرس تخمدان (POI) و کاهش ذخیره تخمدان (DOR) شوند. آلل‌های نرمال بین 5 تا 44 تکرار و آلل‌های متوسط 45 تا 54 تکرار CGG دارند. POI تقریباً یک درصد از زنان زیر 40 سال و 0.1 درصد از زنان زیر 30 سال را درگیر می‌کند. هدف از این مطالعه، تعیین موتاسیون و اندازه‌گیری دقیق تعداد تکرارهای CGG در ژن FMR1 توسط روش TRP PCR، در چهار زن ایرانی دارای دامنه سنی 29 تا 34 ساله با نارسایی زودرس تخمدان و ناباروری ناشناخته است. از آنجایی که 20 درصد خانم‌ها با POF واجد تکرارهای پیش جهشی CGG می‌باشند، بررسی این تکرارها در این بیماران بسیار مهم است چرا که افزایش این تکرارها در نسل‌های بعدی می تواند منجر به تولد فرزندان مبتلا به ناتوانمندی ذهنی سندرم ایکس شکننده گردد.  مواد روش‌ها: چهار بیمار بعد از مشاوره ژنتیک، به آزمایشگاه ژنتیک مولکولی در دپارتمان ژنتیک پزشکی بیمارستان تخصصی و فوق تخصصی زنان صارم ارجاع داده شدند. DNA لنفوسیت‌های خونی با روش Salting Out استخراج شد. تکثیر ژنی در هر بیمار توسط روش TRP PCR و آنالیز محصولات تکثیر ژنی، با استفاده از Capillary Electrophoresis برای تعیین آلل‌های گسترش یافته ژن FMR1 انجام گردید.  یافته ها: در اندازه‌گیری تکرارهای  CGGبرای هر کدام از پروباندها، سه بیمار با آلل پیش جهش بدست آمد که یکی از آن ها هموزیگوت بوده و در دو بیمار آلل PM به صورت هتروزیگوت بود. در بیمار چهارم آلل متوسط هتروزیگوت بدست آمد.  نتیجه‌گیری: در مطالعه انجام شده، آلل‌های پیش جهش و همچنین آلل متوسط ژن FMR1 در بیماران همراه با ناباروری مشاهده گردید. بررسی تکرارهای CGG ژن FMR1 در بیماران با POI و ناباروری با علل ناشناخته، به خصوص در مواردی که تاریخچه خانوادگی از POI وجود دارد، توصیه می شود. </pre> <pre> </pre> <pre> </pre> <pre> </pre> Background and Aims: The fragile X mental retardation 1 (FMR1) gene contains a CGG repeat sequence within its 5’UTR, the expansion of which can result in both neurological and reproductive disorders. Repeats containing more than 200 CGG repeats are defined as a full mutation and cause fragile X syndrome. The repeat numbers between 55 and 200 CGG are defined as permutation (PM) and can cause premature ovarian insufficiency (POI) and diminished ovarian reserve (DOR). Normal alleles have 5 to 44 repeats and intermediate 45 to 54 (IM). POI affects ~ 1% of women before the age of 40 and 0.1% before the age of 30. Twenty percent of women with POI can have the premutation of CGG repeat, which can expand to the full mutation in the following generations causing Fragile X syndrome with Intellectual disability. Therefore it is important to evaluate patients with POF for the presence of CGG repeats. The aim of this study is mutation detection and determination of expanded allele of the FMR1 CGG repeats using TRP PCR in four Iranian women from 29 to 34 years old. Material & Methods: Four women in the age range of 29-34 with premature ovarian insufﬁciency (POI) and idiopathic infertility after genetic counseling were referred to the Molecular Laboratory in the Department of Medical Genetics, Sarem Women's Hospital. DNA of whole blood samples was extracted using the salting-out method. Amplification of the FMR1 gene of every patient was performed by TRP PCR using automated capillary electrophoresis used for the detection of expended FMR1 alleles. Findings: CGG repeats sizing using TRP-PCR identiﬁed 3 women with PM allele, one was homozygote and two were heterozygote for PM allele. Another patient showed a heterozygote IM allele. Conclusion:  In this study, the FMR1 gene PM alleles and also IM allele were associated with infertility. It is recommended that women with POI and Infertility of unknown etiology, and particularly those with a family history of POI, should be considered for the evaluation of CGG repeats. <pre> </pre> <pre> </pre> ژن FMR1؛ نارسایی زودرس تخمدان (POI)؛ ناباروری؛ TRP-PCR. FMR1 Gene, Premature Ovarian Insufficiency (POI), Infertility, TRP-PCR, Fragile X Syndrome. PCR 103 110 http://saremjrm.com/browse.php?a_code=A-10-69-5&slc_lang=fa&sid=1 Akram Abdi اکرم عبدی Ak.abdi1362@gmail.com 10031947532846003920 10031947532846003920 No Sarem Fertility & Infertility Research Center (SAFIR), Sarem Women's Hospital, Iran University of Medical Sciences (IUMS), Tehran, Iran. & Sarem Cell Research Center (SCRC), Sarem Women’s Hospital, Tehran, Iran. مرکز تحقیقات باروری و ناباروری صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران. و پژوهشکده سلولی و مولکولی و سلول های بنیادی صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، تهران، ایران. Tamouchin Moharrami تموچین محرمی Tamochinmoh@gmail.com 10031947532846003921 10031947532846003921 Yes Sarem Fertility & Infertility Research Center (SAFIR), Sarem Women's Hospital, Iran University of Medical Sciences (IUMS), Tehran, Iran. & Sarem Cell Research Center (SCRC), Sarem Women’s Hospital, Tehran, Iran. مرکز تحقیقات باروری و ناباروری صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران. و پژوهشکده سلولی و مولکولی و سلول های بنیادی صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، تهران، ایران. Reza Mahdian رضا مهدیان dr.reza.mahdian@gmail.com 10031947532846003922 10031947532846003922 No Genetic & Metabolism Group, Molecular Medicine division, Biotechnology Research Center, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran. سمت استاد، گروه ژنتیک و متابولیسم، بخش پزشکی مولکولی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران A. Saremi ابوطالب صارمی Dr.saremi@sarem.org 10031947532846003923 10031947532846003923 No Sarem Fertility & Infertility Research Center (SAFIR), Sarem Women's Hospital, Iran University of Medical Sciences (IUMS), Tehran, Iran. & Sarem Cell Research Center (SCRC), Sarem Women’s Hospital, Tehran, Iran. مرکز تحقیقات باروری و ناباروری صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران. و پژوهشکده سلولی و مولکولی و سلول های بنیادی صارم، بیمارستان فوق تخصصی صارم، تهران، ایران.